INSERM U1183 "Cellules souches, plasticité cellulaire, médecine régénératrice et immunothérapies"
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Imagerie du cartilage


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Responsable: Karine TOUPET
Tel:
Email: karine.toupet[a]inserm.fr

Le plateau d’imagerie est équipé de deux appareils permettant d’analyser à la fois le cartilage articulaire et l’os : un microscope laser confocal (Leica Sp5-II) et un microtomographe haute résolution in vivo à rayons X (SkyScan 1176). 
Le microscope confocal offre la possibilité d’imager l’ensemble du cartilage articulaire chez le petit animal. Grâce à des logiciels d’analyse adaptés, une reconstruction 3D du cartilage ainsi que des paramètres quantitatifs (volume, épaisseur, surface) peuvent être obtenus afin d’évaluer la présence ou non d’une dégradation du cartilage. 
Le microtomographe in vivo 1176 peut être utilisé pour de nombreuses applications telles que l’imagerie de l’os, du cartilage et d’organes spécifiques comme le poumon, le rein ou le coeur. Ces images sont reconstruites en 3D et analysées grâce à des logiciels disponibles sur le plateau.   

Matériel et ressourses

Microscope laser confocal Leica SP5-II 

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Microscope laser confocal (Leica Sp5)
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Reconstruction 3D du cartilage articulaire d’un plateau médian de souris (Avizo)

Equipement du confocal Leica SP5-II :

- Trois objectifs à sec : 5x, 10x et 20x
- Deux objectifs à huile : 40x et 63x
- Laser WLL (laser blanc 460-670 nm) et d’une diode 405 nm
- Trois détecteurs spectraux internes
- Système dichroïque électronique AOBS
- Station informatique d’acquisition (logiciel LAS AF) et d’analyse (logiciel Avizo, Visualization Sciences Group)


Applications possibles sur le cartilage :

- Echantillon biologique intact en sortie de scan, possibilité de le réutiliser pour des analyses histologiques.
- Reconstruction 3D de l’ensemble du cartilage articulaire grâce au logiciel d’analyse Avizo.
- Evaluation quantitative de l’état du cartilage articulaire grâce à la mesure de différents paramètres (volume, surface et épaisseur). 


Microtomographe haute résolution in vivo SkyScan 1176    

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Microtomographe in vivo SkyScan 1176
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Logiciel d’acquisition SkyScan avec caméra intégré et système de monitorage physiologique

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Reconstruction 3D d'une articulation de souris
Equipement du microtomographe Skyscan 1176 :

- Six positions de filtre possibles avec changement automatique : sans filtre, Al 0.2 mm, Al 0.5 mm, Al 1 mm, Al 0.5 mm + Cu 0.03 mm, Cu 0.1 mm
- Caméra numérique CCD 12 bits
- Deux lits porte-objet de 33 mm et 65 mm de diamètre adaptés aux souris et rats ; un plateau de 580 mm x 470 mm pour les animaux plus gros tels que le lapin
- Rotation de l’ensemble source / détecteur autour de l’objet statique et présence d’un système anesthésiant permettant d’imager des animaux vivants
- Acquisition sur 180°, 360° ou en mode spiral
- Contrôle du pas de rotation
- Résolutions spatiales possibles : 9 µm, 18 µm et 35 µm par pixel
- Logiciel de monitorage physiologique et caméra intégrés
- Grande vitesse d’acquisition
- Station informatique d’acquisition (logiciel d’acquisition SkyScan) et d’analyse (logiciels NRecon, DataViewer, CTAn, CTVol et CTVox)

Applications possibles :

- Possibilité de scanner l’ensemble du corps d’une souris ou d’un rat
- Imagerie de l’os
- Imagerie du cartilage
- Imagerie d’organes spécifiques tels que le poumon, le rein et le cœur après injection de marqueurs adéquats
- Reconstruction et visualisation 3D des images (logiciels NRecon, CTVol et CTVox)
- Analyse des images avec quantification de nombreux paramètres osseux (densité osseuse,  volume osseux, surface osseuse, nombre de travées osseuses, …) (logiciels DataViewer et CTAn)

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